随着化妆品市场的蓬勃发展，我国已成为世界上第二大化妆品消费市场，近年来，为提高交易量，很多不法商贩在配方中加入激素类药物，从而在短时间内达到皮肤滑嫩，增加皮肤弹性以及祛痘除皱的效果，然而长期使用该产品会导致皮肤产生黑斑、萎缩变薄，甚至还可能产生激素依赖性皮炎，我国《化妆品安全技术规范》（2015版）中明确规定抗感染类药物、抗雄性激素物质、糖皮质激素类、雌激素类、孕激素类、具有雄性激素效应的物质为化妆品组分中的禁用物质，对国家药监局网站五年内发布的不合格化妆品中非法添加情况进行统计，结果显示非法添加的激素类药物多种多样，含量范围广，为确保化妆品安全使用、保障使用者的身体健康，对化妆品中激素类物质的检测具有重要意义。

      本文使用谱育科技的超高效液相色谱—三重四极杆串联质谱仪建立了检测化妆品中的63种激素类药物的方法，该方法检测速度快且灵敏度高，可用于进行化妆品中激素类药物检测。

实验部分

试样、标准品、试剂和设备

      试样：某品牌护手霜。

      标准品：63种激素类药物混合标准品购自阿尔塔，于-20℃冰箱保存。

      试剂：乙腈为色谱级。

仪器：ULC 510超高效液相色谱仪（具体配有二元超高压输液泵、超高压自动进样器、柱温箱）、EXPEC 5210三重四极杆串联质谱仪。

液相和质谱条件

样品前处理

      称取样品0.2 g（精确到0.001g），置于10 mL具塞比色管中，加入少量乙腈，在涡旋混合仪上振荡30s至试样与提取溶剂混合均匀，然后加入乙腈至近刻度，超声提取20 min，静置至室温，用乙腈定容至刻度，摇匀，以4000 r/min离心10 min，滤过（必要时取上清液适量用50%乙腈溶液稀释，稀释液经0.22 μm滤膜过滤），滤液作为待测溶液。

线性

      使用空白基质稀释激素类药物混合标准品储备液，配制浓度为0.5 μg/L、1 μg/L、2 μg/L、5 μg/L、10 μg/L、20 μg/L、50 μg/L、100 μg/L的标准溶液，按照上述方法进样，以特征离子质量色谱峰面积为纵坐标，对应标准溶液浓度为横坐标，采用外标法拟合标准曲线，空白基质色谱图如图1所示，0.5 μg/L的标准品色谱图如图2所示，各化合物线性相关系数r均大于0.995，线性良好。

图1 空白基质色谱图

图2 0.5 μg/L的激素类药物标准品色谱图

检测限和定量限

      配置浓度为0.5 μg/L浓度标准溶液进样，按照S/N=10和S/N=3计算定量限和检出限，结果如表2所示，各化合物检测限在0.0002 μg/g ~0.0036μg/g，定量限在0.0006 μg/g ~0.0119 μg/g。

回收率

      2 μg/L浓度下，各激素类药物的回收率在75.25%~97.97%，20 μg/L浓度下，各激素类药物的回收率在80.16%~104.14%，50 μg/L浓度下，各激素类药物的回收率在90.40%~112.26%。

样品分析

      分别取三份样品进行样品前处理，按以上方法测定，平行进样3次，样品中激素类药物色谱图如图4所示，激素类药物含量如下表所示，结果表明，样品中没有63种激素类药物存在。

图4 样品中63种激素色谱图

结语

      本文建立了一种使用EXPEC 5210三重四极杆液质联用仪测定化妆品中激素类药物的方法。63种激素类药物在0.5 μg/L ~100 μg/L浓度范围内线性相关系数大于0.995，线性良好；对浓度为1μg/L、10μg/L、100g/L的标准工作液连续测定6次，各种激素类药物的保留时间相对标准偏差在0.02%~0.17%，峰面积相对标准偏差在1.65%~6.21%,计算浓度相对标准偏差在1.66%~4.99%，精密度良好；经检测和计算，使用该方法，各种激素类药物的检测限在0.004 ~0.02μg/g，定量限在0.006~0.012 μg/g；激素类药物在2 μg/L、20 μg/L、50 μg/L浓度水平的回收率在75.25%~112.26%之间。使用该方法进行实际样品测试，表明应试品牌护手霜中不含63种激素。以上结果表明，该方法灵敏度较高，可以快速、准确地检测化妆品中63种激素的含量。

l 附录

设备与耗材方案

一、EXPEC 5210 ESI离子源配置详情